Leica全自动染色封片工作站的使用体会

随着病理学技术的迅速发展，全自动染色封片一体化工作站以其卓越的性能和良好的处理效果，特别是其稳定、高效的染色过程，逐渐被各大医院和相关实验室接受并使用，并逐步替代目前的人工染色。自将工作站应用于常规HE染色以来，经过近10万例的实际应用，切片染色效率明显提高，染色效果稳定，染色质量显著改观 。

1 材料与方法

1.1 仪器设备

德国Leica全自动染色封片工作站，包括全自动染色机（ST5020）、封片机（CV5030）、染色架8个（每个染色架可装30张玻片）。

1.2 试剂

二甲苯，无水乙醇，95%乙醇，80%乙醇，75%乙醇，Harris苏木素，0.5%水溶性伊红，1%盐酸乙醇，1%氨水，苯酚二甲苯混合液，中性树胶。

1.3 处理过程

各种组织经固定、脱水、透明、石蜡包埋后制成3μm切片，按病理编号依次插入染色架，70℃烤箱烤片10 min左右，即可上机染色，具体染色步骤见表1。染色完成后，染色架由机械臂自动转入封片机中，使用国产玻璃盖玻片（24 mm×50 mm），中性快干胶封片。

2 结果

石蜡切片HE染色均匀、色彩鲜艳，红蓝分明，胞质、胞核结构对比清晰；无气泡、无溢胶现象。

3 讨论

传统手工染色操作繁琐，劳动强度大，温度、时间、试剂、环境、个体差异等因素皆可影响染色效果，不适合大批量标本的染色处理。而全自动组织切片染色机因其独特的以人为本的智能化设计理念、周到而完善的处理程序，不但极大地保证了切片染色质量的高效性、稳定性，还可以减轻工作强度和改善工作环境。

3.1 优点

3.1.1 效率高 可进行批量标本的染色，最多12个染色架同时染色，每个染色架装30张切片，并可同时运行多个程序，尤其适用于标本量大的单位。与传统手工染色相比，染色同时工作人员可进行其他工作（如切片），工作时间统筹化，整体工作效率得以提高。

3.1.2 稳定性好 染色封片工作站的各步骤均由单片机控制，时间控制精准、严密。在程序设定合理的前提下，染色效果更稳定[3]。有报道，室温低于15℃时染色效果不佳，应适当提高室温[2]。我科室日常工作中室温始终保持在23℃左右，染色效果稳定，无明显差异。可设置数个精确步骤（如苏木素、分化），当相邻染色架出现时间冲突时，优先确保精确步骤染色。

3.1.3 保障 具有断电记忆功能，断电重新启动后，可以继续染色流程，不必从头重复染色。可选配UPS电源，在主电源缺乏时持续供电，保障染色工作继续完成。

3.1.4 安全 工作站在相对密闭的空间中进行染色封片，大大减少了有毒挥发性试剂（尤其是二甲苯）对工作环境及工作人员的危害。我科室将染色工作站放于通风橱中，更加有利于对环境和人员的保护。

3.1.5 便于质控 自动染色机调整好各步骤时间，可产生精确而连贯的染色、分化、脱水等过程，与传统染色相比，受人为因素影响较小；同时可以限定各染色切片的数量，到达使用期限，机器会自动报警提示，对常规染色的质量控制提供了可靠平台。

3.2日常使用时的注意事项

3.2.1 染缸的排列 染缸中的液体尽量按照染色步骤依次排列，所有需要冲水的步骤都应靠近水缸，并使机械臂行进的路线时间最短化；机械臂前进时有一定的回转，合理设计避免玻片上的试剂滴入其他染缸造成污染；透明用二甲苯靠近染色机出口位置，便于将玻片快速转入封片机进行封片。

3.2.2 试剂的使用与更换 根据实际工作情况，我科使用成品Harris苏木素染液（珠海贝索），染片约2500张；使用0.5%水溶性伊红，滴加1～2滴冰醋酸促染，染片约2500张；其他脱蜡二甲苯、脱水梯度酒精、透明二甲苯、分化1%盐酸乙醇及返蓝用1%氨水，染片600张左右。保证每缸液体量在最低限度以上，染色时间可根据具体情况适当调整。

3.2.3 盖片机使用注意 每日工作前，检查滴加中性树胶的管道及喷嘴是否通畅，出胶量是否合适；盖片机的浴槽中保持一定量的二甲苯，保证封片时玻片的湿润；添加盖玻片时最好带手套操作，防止水汽进入玻片中间，保持盖玻片的干燥，方便吸取，避免出现重叠、碎片现象；切片全部盖完后，染色架自动送入右侧滑道，当≥2个染色架累积于滑道时，机器出现报警声，所以应及时取出空染色架；每个输出架能装30张切片，封片机最多连续封片60张，染色盖片完成后，及时将切片取出，保证输出架有足够的空槽接收新的玻片。

3.2.4 机器的维护保养 染片机水槽底部有数个漏孔，为流水冲洗时的进水孔，每天染色结束后将水排净，防止生霉，注意定时清洗，避免被水垢、染料等堵塞；染色缸每周更换试剂时及时用纱布擦拭及清洗，各种试剂用专门的染色缸，避免交叉使用，影响染色效果；必要时和厂家服务人员联系进行专业维护和保养。

综上所述，全自动染色封片工作站操作简单方便，染色效率高效果好，改善工作环境。除应用于常规HE染色外，在部分特殊染色和快速冰冻切片染色中也得到较好应用，充分发挥其优势，更好促进病理技术的发展。