Campden冷冻切片机的使用和维修(一)

作者：Campden维修发布时间：2022-02-07 17:37点击：

CampdenCM3050S 型冷冻切片机的使用

病理检查首先需要将切下的病变组织器官作一系列技术处理，包括固定、取材、脱水、浸蜡、包埋、切片和染色等，一般需花费 24 h 方可完成全部制片过程，然后由病理医师用显微镜观察，并做出诊断。这种检查方法称为常规石蜡切片，是病理检查中最常用的方法，但这种方法前后通常需要 3 d 的时间。有时外科医师希望在手术过程中马上了解病变的性质，以便及时确定手术范围，就要求病理医生快速做出病理诊断，在这方面上冷冻切片更具有优势，也避免了石蜡切片因高温烤片而导致破坏组织抗原性的可能性。冷冻切片是酶组织化学和免疫组织化学染色中最常用的一种切片方法，其最突出的优点是能够较完好地保存细胞膜表面和细胞内多种酶活性以及抗原的免疫活性，尤其是细胞表面抗原更应采用冷冻切片技术。新鲜组织和已固定的组织均可作冷冻切片。为了得到高质量的冷冻切片，选择好的冷冻切片机是保证切片质量的关键。恒冷箱切片机是目前最常用的冷冻切片机，可得到3~5 μm的连续薄片。现主要以 Campden CM3050S 为例来探讨恒冷箱冷冻切片机的使用与维修。

1 Campden冷冻切片机的介绍

Campden CM3050S 是一种有效的低温控制器，用于组织样本的快速冷冻和切片。 Campden CM3050S 具有电动和手动两种切片功能，可实现 3 种自动切片模式，分别是间断切片模式、连续切片模式和单次切片模式，速度可调节，分粗调和细调，厚度范围 0.5~300 μm；还具有自动修切功能，厚度范围 5~150 μm；除霜有冷冻箱自动除霜、冷冻箱手动除霜和速冻架手动除霜模式，冷冻箱自动除霜可以在 15 min 范围内调节，24 h 一次自动解冻循环，时间范围 6~12 min；冷冻室温度范围 -40~0 ℃，还具有独立的样本制冷系统，样本头制冷温度 -50~-10 ℃。

2 Campden冷冻切片机的使用

2.1 使用前的安全事项

开始冷冻之前必须将所有敏感材料从冷冻室移出。有下列情况者，一定要将刀刃用护刀器遮盖并且锁定手轮：

（1）在刀或样本上进行操作前；
（2）更换样本前；
（3）工作间隔。为了保证安全性，需将手轮轴居中。当仪器温度很低时，使用者需要带手套操作，否则有冻伤的可能性。所有从低温室中取出的配件或工具，在重新放回室内之前，一定要完全干燥，否则可能导致仪器结霜。

2.2 工作条件的设置

仪器使用时的周围温度应控制在 18~35 ℃。开始工作时，先按控制面板的设定键的菜单要求设置箱体温度，通过箭头键选择合适的箱体温度。再按设定键设置样品头温度。然后依次按设定键和箭头键设置当地时间、除霜起始时间、除霜时间及其他参数。所有的设置都要按顺序并在规定时间内设置，否则显示会回到实际温度状态，需从第一项重新进行设置。

2.3 样本的冷冻

由于各种组织的结构不同，组织切片的适宜温度也不同[2]，要切好冷冻切片，需选择好适宜的温度，过高或过低的温度都会影响切片的质量。需根据切片的样本来选择冷冻室参考温度和样本参考温度，表 1 提供了一般常用组织的参考切片温度，具体采用的温度还需操作者在实践过程中进行摸索从而积累经验。当样本温度未达到设定数值之前，操作者禁止继续操作。

2.3.1 使用冷冻架和吸热锤冷冻样本

使用快速冷冻架和固定的吸热锤套件将样本冷冻到样本托盘中。

（1）排列好样本；
（2）在室温条件下将足够的包埋剂滴至样本托盘上；
（3）在冷冻室内，将样本装入托盘内并且定位；
（4）将带有样本的样本托盘放入快速冷冻架上的 10 个开口之一进行冷冻，冷冻步骤可以通过固定的吸热锤套件来加速，在导热块摆放位置的旁边，可以安装 3 个样本盘并且留出其转动范围；
（5）将吸热锤放置到样本表面，大约 30 s 后，样本就完全冷冻。

2.3.2 使用 90°棱镜冷冻样本

使用 90°棱镜将样本冷冻到样本盘上（只适用于带有样本冷冻系统的仪器）。在带有样本冷冻系统的仪器中， 90°棱镜插在样本头内，是一种可选择用在最大温度下冷冻样本的装置。

（1）在室温条件下将足够的包埋剂滴至样本托盘上，加入样本并且定位；
（2）将带有样本的样本盘插入棱镜的插座；
（3）激活菜单选项“快速冷冻”，启动激活功能，此时，样本头将自动冷冻到最低温度（-50℃）；
（4）待样本冷冻完成，将托盘从棱镜处移开，放置在快速冷冻架中，直到将其插入样本头内；
（5）再次按下激活菜单选项“快速冷冻”，启动激活功能，此时样本头的温度将自动回到预先选择的设定数值；
（6）旋松样本头上的螺钉，移开棱镜，将棱镜放置在冷冻室内。

切片温度的参考（℃）被关闭或遇到断电，待切片机由低温状态恢复到室温后，将刀架以及刀架底座移出，清洁消毒干燥后再重新组装，间隔时间需超过 10 min[3]。切片机、冷冻室及所有的配件一定要进行消毒并且干燥。彻底清洁后还要给仪器加防冻润滑油进行保养，延长仪器的使用寿命。特别是压缩机的保养，在使用过程中需要定期检查，注意散热器和缝隙之间要彻底清洁 [4]。

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